导读：应用拉曼光谱结合化学计量学方法对蜂蜜果糖和葡萄糖含量进行了定量分析。

近红外光谱技术因具有快速、简便、无损检测分析的优点，该技术用于蜂蜜中糖类物质的检测已有较多报道[3,4-6]。拉曼光谱技术具有与近红外光谱技术类似的优点，在农产品及食品的快速无损检测方面都有应用研究[7-8]。该技术用于蜂蜜掺假鉴别国内外都有相关研究报道[9-10]，而在蜂蜜中糖类物质的检测方面除国外有相关报道外[11-12]，国内鲜有报道。国外的报道中，Batsoulis A N 等仅用了 21个样本，其中 11 个用于建立偏最小二乘（parcialleast squares，PLS）模型，10 个用于预测，对蜂蜜中的果糖和葡萄糖含量进行了定量分析[11]；Beril Özbalci 等所用样本为超市购得的 22 个不同品牌蜂蜜样本混合后得到的 90 个样本，分别用PLS算法和人工神经网络（artificial neural networks，ANN）法建模，对蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖进行了定量分析[12]。二者的研究表明拉曼光谱结合化学计量学方法具有定量测定蜂蜜果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的潜力。但在他们的研究中，一是样本数量偏少，二是样本品种和收集年份都较单一，因而代表性差。本研究所用样本为 3个年份收集的来自中国 10 个省区的 16 个品种，分别用线性的 PLS 算法和非线性的支持向量机（support vector machines，SVM）算法对蜂蜜果糖和葡萄糖含量进行定量分析，以便更好地检验拉曼光谱技术快速无损检测蜂蜜果糖和葡萄糖含量的应用能力。

试验所用蜂蜜样本共 74 个，包含 2008 到 2010年 3 个年份采集的 16 个品种（荆条、油菜、老瓜头、柑橘、洋槐、荔枝、九龙藤、黄芪、枣花益、母草、枸杞、野菊花、桂圆、山桂花、苹果和多花蜜），来自全国 10 个省区（广西、广东、湖南、湖北、四川、宁夏、贵州、山西、陕西和云南），是从蜂农处直接收购。所有样本收集后置于 4～6℃冰箱内贮藏。采集光谱时，先将蜂蜜从冰箱内取出，放置至室温，再在 55℃水浴下溶解晶体后，室温放置至约 25℃，采集光谱。

按国标 GB/T 18932.22 的方法——高效液相色谱示差折光检测法测定。

液相色谱条件：色谱柱：Lichrospher NH2 柱（10 nm×5 μm，4.6 mm×250 mm，江苏汉邦）；柱温：30℃；检测器：RID-10A 示差折光检测器（日本岛津）；检测器温度：35℃；流动相：乙腈＋水（体积比：77∶23）；流速：1.0 mL/min；进样量：15 μL。

仪器：i-Raman 高性能便携式激光拉曼光谱仪（BWS 415-785H，B&WTEK Inc. USA），配有光纤探头；检测器为 2048 像素的热电冷却电荷耦合器（ thermoelectric cooled charge-coupled device,TEC-CCD），测量光谱范围 175～2 600 cm-1。光谱采集参数：激发波长 785 nm，光谱分辨率 3 cm-1，积分时间 15 s。

将蜂蜜样品加入 1 cm 石英比色皿中，将比色皿置于仪器配备的支架上，选择发射功率为总功率的 60%采集光谱。每个样本平行 3 次采集，取平均光谱。