导读：用高效液相色谱-二极管阵列检测法测定荔枝蜜、龙眼蜜、枇杷蜜、椴树蜜、枣花蜜等8种单花蜜中的脱落酸以及没食子酸、咖啡酸、α-儿茶酸、p-香豆酸、芦丁、木犀草素等14种多酚。

2.4 加标回收率实验

准确称取野桂花蜜100g，加入0.5mL的混合标准溶液，混匀后按1.5节的样品处理方法进行处理，并在1.4节的色谱条件下重复进样3次，测得回收率见表2。由表2可知，荔枝蜜中15种物质的加标回收率在92.4%～102.1%之间，说明本方法回收率较好。

2.5 样品测定

根据前述的1.5节样品提取条件及1.4节色谱条件，对8种蜂蜜样品中的脱落酸及14种多酚进行测定，结果见图2及表3。

由图2可知，不同蜂蜜在同一波长下所得图谱差别较大，其中野桂花蜜最为明显，除未知物G1外，其他物质峰值均较低；不同蜂蜜酚酸黄酮的分布不同，野桂花蜜出峰时间集中在30～55min，酚酸物质较少；枇杷蜜中黄酮酚酸种类较多，含有未知物G3、G4，分别在320nm及340nm有最大吸收，其中G2为混合物；枣花蜜中各物质分布比较均匀，其中F1峰值较大。对比枣花蜜、荔枝蜜可知，荔枝蜜中各物质吸收峰相对均较高，杨梅酮和脱落酸最为明显。

由表3可知，不同蜂蜜所含的15种标准物质含量差别较大，枇杷蜜中α-儿茶素含量最高，杨梅酮次之；枣花蜜中阿魏酸、杨梅酮含量较高；椴树蜜中槲皮素最多，荔枝蜜中脱落酸最多；益母草蜜、野桂花蜜、紫云英蜜均含有较多的原儿茶酸；龙眼蜜中含有较多的阿魏酸、木犀草素，这与郭夏丽等[9]的结论一致。

同一种物质在不同蜂蜜中的含量差别也很大，就脱落酸而言，荔枝蜜、龙眼蜜中脱落酸含量最高，远高于其他蜜种，并均高于自身总酚酸含量；就酚酸而言，原儿茶酸与p-香豆酸分布相对比较均匀，而阿魏酸含量差别较大，在枣花蜜、荔枝蜜中最高，在野桂花蜜、紫云英蜜中含量较少；咖啡酸、没食子酸在8种蜂蜜中含量均较低；就黄酮而言，8种蜂蜜中杨梅酮及槲皮素含量相对较高，芹菜素、山奈酚的含量则较低，其中杨梅酮、槲皮素在荔枝蜜中含量最大，芦丁及木犀草素在龙眼蜜中最多；芹菜素在益母草蜜、紫云英蜜及野桂花蜜中未被检出。

由表3可知，不同蜜种总酚的含量差异较大，总酚酸总黄酮的比例分布也不同。荔枝蜜、龙眼蜜的总酚含量最高，均大于2000μg/100g蜂蜜，而野桂花蜜、椴树蜜的总酚含量则较低；龙眼蜜的总酚酸含量最高，占其总酚含量的28%，而荔枝蜜、龙眼蜜则含有最多的黄酮，分别占其总酚含量的80%、71%。

3 讨论与结论

酚酸黄酮作为微量活性物质，在不同植物中分布差异较大，可以利用其差异来进行植物来源的判别。脱落酸作为一种植物激素，在植物干旱、高盐、低温和病虫害等逆境胁迫反应中起重要的信号传导作用，其含量变化与植物的种类及生长环境密切相关[12]。

目前，国内外对蜂蜜中多酚的研究较多，并已用于单花蜜的蜜源判别及掺假检测。李菁等[8]对刺槐蜜的3种酚酸进行研究，王文静[13]对洋槐蜜中的3种黄酮进行检测，制定了洋槐蜜黄酮化合物指纹谱图。周梦遥[14]对油菜蜜、向日葵蜜中的10种多酚进行检测并制定相关图谱。Lihu等[15]对澳大利亚5个植物属的16种蜂蜜进行了黄酮类物质的分析，得出利用总黄酮含量来区分蜜种的结论。Mustafa等[16]对马来西亚蜂蜜中的多酚物质进行分析，并对其抗炎性进行研究，证实不同蜂蜜中多酚物质含量不同，抗炎作用也不同。Isabel等[17]对西班牙地中海沿岸60种柑橘蜜及柠檬蜜的10种多酚物质及37种挥发性物质进行分析，成功区分出两种蜂蜜。本实验对8种蜂蜜的14种多酚进行分离检测，为单花蜜的蜜种识别及活性成分分析提供依据。

把脱落酸的检测与蜂蜜蜜源识别相结合的研究在国内较少，国外则相对成熟。Federico等[3]确定脱落酸为石楠花蜜的主要成分，并将其用于单花蜜的蜜源判断。Lihu等[4]将脱落酸作为桉树蜜地理来源的判别物。Izabela等[18]测定了土耳其石楠花蜜及荞麦蜜中的脱落酸及酚酸，将总酚酸的含量与与脱落酸含量作为两种蜂蜜植物来源的判别标准。Jasna等[19]利用液-质联用技术对斯洛维尼亚7种蜂蜜中的脱落酸及黄酮进行了研究，用其含量及组成来区分7种蜂蜜。本实验依据脱落酸及多酚含量高低，将脱落酸、杨梅酮及总酚含量作为荔枝蜜的检测标准，将咖啡酸、α-儿茶酸含量作为枇杷蜜的判别标准；3,4-二甲氧基肉桂酸、木犀草素及脱落酸含量作为龙眼蜜的检测标准，将芦丁及山奈酚含量作为益母草蜜的检测标准，α-儿茶酸、芹菜素作为枣花蜜的检测标准，原儿茶酸作为紫云英蜜的检测标准。这些研究结果进一步表明将脱落酸的测定与多酚测定相结合将成为识别蜂蜜种类、鉴别单花蜜掺假的有效方法。

本实验虽然成功分离鉴别出了14种多酚，但研究过程中标准物质种类有限，尚有多酚物质未能确定，这需要结合质谱分析进行进一步的判断。同时，采集样品的数量有限，有关产地来源的分析及指纹图谱的建立，还需要搜集不同地区的同种蜂蜜作进一步的研究。