导读：建立了高效液相色谱法用于检测新西兰 Manuka 蜂蜜中的甲基乙二醛。

2008 年，Mavric 等［4］发现甲基乙二醛( methylglyoxal，MGO)可能是 Manuka 蜂蜜具有 NPA 的主要物质基础。同年，Adams 等［5］也报道了相同的结论，并且发现 Manuka 蜂蜜中 MGO 的含量与 NPA 的相关性高达 0. 98。由于采用微生物方法检测 NPA 操作比较繁琐，结果变异较大，而且物质基础不明确，因此部分研究人员呼吁采用 MGO 的含量来代替UMF 值用于标示 Manuka 蜂蜜的 NPA。但是，也有部分研究人员认为还没有充分的证据证明 MGO 能完全代表 Manuka 蜂蜜的 NPA，而且 UMF 更能体现新西兰 Manuka 植物的地域独特性和绿色环保理念。因此，目前市场上销售的 Manuka 蜂蜜的产品包装上会有 UMF 和 MGO 两种指标来标示 Manuka蜂蜜的抗菌活性。

目前国内对 Manuka 蜂蜜的研究较少，且主要集中在其抗菌活性方面。朱威等［1］和玄红专等［2］综述了国外对 Manuka 蜂蜜抗菌活性的研究。孙艳萍等［6］研究了 Manuka UMF25 + 、UMF10 + 以及其他 7 种蜂蜜对铜绿假单胞菌的体外抗菌活性，结论为 9 种蜂蜜在体外均可抑制铜绿假单胞菌，进口蜜更佳。对 Manuka 蜂蜜中相关物质的检测方法，仅见吕辰等［7］采用高效液相色谱-串联质谱法对多种蜂蜜中的 5 种双稠吡咯啶类生物碱进行了筛查，结果发现野百合碱、克氏千里光宁和倒千里光碱均未检出，而千里光菲啉和千里光宁在大多数蜂蜜中均能检出。

MGO 属于二羰基化合物，国内报道的检测方法集中在大气环境监测领域。李阳等［8］建立了一种五氟化苯肼衍生化-热解吸-GC /MS 方法对大气中23 种羰基化合物进行了测定。牟翠翠等［9］和冯艳丽等［10］分别报道了 2，4-二硝基苯肼衍生-高效液相色谱法用于测定大气中二羰基化合物。邹婷等［11］采用五氟苄基羟胺衍生与 GC /MS 联用的方法分析了大气中的单羰基化合物和多羰基化合物。对于蜂蜜中 MGO 的检测方法，目前国内尚无相关文献报道。对此，本实验室开发了高效液相色谱法对Manuka 蜂蜜的 MGO 含量进行检测。

Agilent 1200 液相色谱仪，配有自动脱气机、二元高压泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器及 ChemStation 数据处理软件( 美国 Agilent 公司) ;PUＲELAB Option-Q15 纯水仪( 英国 ELGA 公司) ; 电子天平( 精确到 0. 000 01 g，德国 Sartorius 公司; 精确到 0. 01 g，瑞士 METTLEＲ TOLEDO 公司) 。

MGO 对照品( 40% 水溶液) 购自美国 SigmaAldrich公司; 邻苯二胺( o-phenylenediamine，OPD)购自阿拉丁化学试剂( 上海) 有限公司; 甲醇( 色谱纯，德 国 Merck 公 司 ) ;水为超纯水(18.2MΩ·cm);0.22μm有机滤膜(德国Membrana公司) 。

Manuka 蜂蜜样品由新西兰 UMF 蜂蜜协会提供，中国蜂蜜样品由通标标准技术服务有限公司提供。

精密量取 MGO 对照品 100 μL，用水稀释并定容至 10 mL，配成 4 g /L 的标准储备液( 4 ℃ 避光保存) 。临用前用水将标准储备液逐级稀释为适当浓度的标准工作溶液。

精密称取邻苯二胺 0. 6 g，用水溶解并定容至100 mL，配成 6 g /L 的邻苯二胺水溶液。

称取 1 g 蜂蜜溶于 10 mL 水中，取 1 mL 该蜂蜜水溶液与 1 mL 邻苯二胺水溶液( 6 g /L) 混匀，在室温、避光条件下进行衍生化反应 8 h 以上，过 0. 22μm 滤膜后进样分析。

色谱柱: Kromasil 反相色谱柱( 150 mm × 4. 6mm，5 μm) ; 流动相: 0. 1% ( v /v) 乙酸水溶液( A) 和甲醇( B) ; 检测波长: 318 nm; 流速: 1. 0 mL /min; 柱温: 30 ℃ ; 进样量: 10 μL; 保留时间: 10. 3 min。梯度洗脱程序: 0 ～ 5 min，30% B; 5 ～ 10 min，30% B ～90% B; 10 ～ 15 min，90% B; 15 ～ 16 min，90% B ～30% B; 16 ～ 20 min，30% B。