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高效液相色谱测定蜂蜜中的脱落酸、黄酮和酚酸

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2016年09月26日 13时43分55秒 来源: 互联网
导读:用高效液相色谱-二极管阵列检测法测定荔枝蜜、龙眼蜜、枇杷蜜、椴树蜜、枣花蜜等8种单花蜜中的脱落酸以及没食子酸、咖啡酸、α-儿茶酸、p-香豆酸、芦丁、木犀草素等14种多酚。

高效液相色谱测定蜂蜜中的脱落酸、黄酮和酚酸
孙崇臻,王 超,蔡子哲,陈沿廷,吴希阳*
(暨南大学理工学院食品科学与工程系,广东 广州 510632)
摘 要:用高效液相色谱-二极管阵列检测法测定荔枝蜜、龙眼蜜、枇杷蜜、椴树蜜、枣花蜜等8种单花蜜中的脱落酸以及没食子酸、咖啡酸、α-儿茶酸、p-香豆酸、芦丁、木犀草素等14种多酚。结果表明,不同种蜂蜜的脱落酸含量有明显的差异,荔枝蜜含量最高(1321.9μg/100g),野桂花蜜含量最低(16.4μg/100g);不同种蜂蜜其酚类物质分布不同,总多酚含量在325.3μg/100g(野桂花蜜)到2260.8μg/100g(龙眼蜜)之间,其中荔枝蜜的总黄酮含量最高,龙眼蜜的总酚酸含量最高;除山奈酚、芹菜素外,其他12种多酚在所有样品中均有检出,其中山奈酚仅在龙眼蜜、枇杷蜜、荔枝蜜、枣花蜜、紫云英蜜中检出,芹菜素在枇杷蜜、枣花蜜、椴树蜜、荔枝蜜、龙眼蜜中被检出;阿魏酸、杨梅酮、槲皮素在荔枝蜜中含量最高,枇杷蜜中含有较多的α-儿茶酸;龙眼蜜中含有较多的p-香豆酸、3,4-二甲氧基肉桂酸、木犀草素。本研究将脱落酸的检测与多酚检测相结合可以为蜂蜜的蜜种判别提供依据。
关键词:蜂蜜;黄酮;酚酸;脱落酸;高效液相;单花蜜检测
Determination of Flavonoids, Phenolic Acids and Abscisic Acid in Honeys of Different Floral Origins by HPLC
SUN Chong-zhen,WANG Chao,CAI Zi-zhe,CHEN Yan-ting,WU Xi-yang*
(Department of Food Science and Engineering, College of Science and Engineering, Jinan University, Guangzhou 510632, China)
Abstract:Flavonoids (rutin, myricetin, quercetin, naringenin, luteolin, keampferol and apigenin), phenolic acids (gallic acid, catechin, caffeic acid, α-catechin, p-coumaric acid, ferulic acid and 3,4-dimethoxycinnamic acid) and abscisic acid in honeys of different floral origins (lichee honey, longan honey, loquat honey, linden honey, date honey, lenourus honey,osmanthus honey, and Chinese milk vetch honey) were analyzed by HPLC-PDA. There were significant differences in the contents of abscisic acid among different samples. Abscisic acid content was ranged from 16.4 μg/100 g (osmanthus honey)to 1321.9 μg/100 g (lichee honey). Total phenolic contents of eight honey samples varied from 325.3 to 2260.8 μg/100 g honey. Among them, keampferol was be detected only in longan honey, loquat honey, lichee honey, date honey and Chinese milk vetch honey. Lichee honey contained the highest amount of ferulic acid, myricetin and quercetin. However, α-catechin was the main component in loquat honey. Longan honey contained a considerable amount of 3,4-dimethoxycinnamic acid,p-coumaric acid and luteolin. These results show that the profile of flavonoids, phenolic acids and abscisic acid could be used for authenticating the floral origin of a honey sample.
Key words:honey;flavonoids;phenolic acids;abscisic acid;HPLC;monofloral honey detection
中图分类号:TS207.3 文献标志码:A 文章编号:1002-6630(2013)10-0281-05 
蜂蜜是指蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露,与自身分泌物混合后,经充分酿造而成的天然甜物质[1]。
根据蜜源植物种类的不同,蜂蜜可以分为单花蜜及混合蜜(又称杂花蜜)[1]。蜂蜜中除了含有葡萄糖、果糖等糖类物质外,还含有丰富的氨基酸、蛋白质等营养成分及黄酮酚酸等生物活性物质[2]。
不同种类的蜂蜜其化学成分不同,利用对蜂蜜化学成分的分析来判断蜂蜜植物来源及地理来源已成为一种研究方向[3]。目前国外相关研究较多,尤其是对微量活性物质黄酮酚酸及植物激素脱落酸的研究。Federico等[3]
对葡萄牙产的22种单花蜜进行脱落酸的研究,确定脱落酸为石楠花蜜的主要成分,并将其用于单花蜜的蜜源判断。Lihu等[4]研究了9种桉树蜜的脱落酸及酚酸,得出红树蜜中脱落酸含量最高,将脱落酸作为桉树蜜地理来源的判别物,同时没食子酸、鞣花酸、肉桂酸作为澳大利亚桉树蜜的标志物。Lsabel等[5-6]利用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)技术分析了突尼斯蜂蜜中的酚类物质,确定了坎菲醇与8-氧基-坎菲醇为迷迭香蜜的标志化合物,同时从澳大利亚产的小桉树蜜中鉴定出毛地黄黄酮与五羟黄酮,并证明它们可以作为不同种类桉树蜜的标志物。Francisco等[7]用HPLC法对52种单花蜜进行多酚的测定,在石楠蜜中发现了脱落酸、鞣花酸;在栗树蜜、向日葵蜜、薰衣草蜜中发现了香豆酸、肉桂酸、阿魏酸等酚酸物质。
李菁等[8]对陕西省不同地区的8种刺槐蜜的酚酸类物质进行了研究。郭夏丽等[9]采用HPLC技术,分析了洋槐蜜、枣花蜜等7种蜂蜜中的23种多酚物质,并对其抗氧化性进行研究。
本研究利用HPLC-二极管矩阵检测器(photo diode array,PDA)色谱技术对枇杷蜜、枣花蜜等8种蜂蜜中的脱落酸和14种多酚进行了测定,为单花蜜的蜜种识别及其质量监测提供依据,其中龙眼蜜、荔枝蜜、枇杷蜜为南方特有蜜种,目前国内对这3种蜜的研究较少,对其进行研究在一定程度上扩大了检测蜜种的范围。同时,多酚物质的检测为蜂蜜的活性成分分析提供依据。
1 材料与方法
1.1 样品采集
采集了2011年4~8月生产的8种蜂蜜,荔枝蜜(广东广州)、龙眼蜜(广东广州)、枇杷蜜(广东广州)、椴树蜜(福建福州)、枣花蜜(江西永丰)、益母草蜜(广西柳州)、野桂花蜜(广西柳州)、紫云英蜜(上海奉贤)。所有样品均置于4℃冰箱保存。
1.2 试剂
槲皮素、芦丁、3,4-二甲氧基肉桂酸、原儿茶酸、Amberlite XAD-2吸附树脂 美国Sigma公司;咖啡酸、α-儿茶酸、p-香豆酸、阿魏酸、柚皮素、木犀草素、山奈酚、芹菜素 成都生物技术有限公司;脱落酸、杨梅素上海佳和生物科技有限公司。甲醇(色谱纯) 霍尼韦尔中国有限公司;乙醚、甲酸为分析纯;水为超纯水、蒸馏水两种。
1.3 仪器与设备
LC-20AT高效液相色谱仪(配有SPD-M20A二极管阵列检测器、SIL-20A自动进样器及CLASS-VP工作站) 日本岛津公司;SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵 巩义市英峪予华仪器厂;ZFQ-85A旋转蒸发仪 上海医械专机厂;B-260型恒温水浴锅 上海亚荣生化仪器厂。
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