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油菜花粉过敏原的分析、鉴定与纯化

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2016年04月28日 00时06分50秒 来源: 互联网
导读:对油菜花粉变应原进行了初步的分离、鉴定和纯化,为临床油菜花粉变态反应疾病的诊断和治疗奠定了基础。

2结果
2.1油菜花粉粗浸液的SDS-PAGE 油菜花粉粗提液进行SDS-PAGE,结果如图1所示,主要有10余条深浅不一的蛋白区带,其中10000区带蛋白含量最丰富。
2.2油菜花粉特异性变应原鉴定 用油菜花粉过敏患者血清对油菜花粉粗浸液中的变应原进行免疫印迹(图2),结果显示,油菜花粉提取液中可与过敏性病人血清IgE结合的蛋白质相对分子质量分别为30000、25000、15000和10000,其中相对分子质量为15000和10000的为主要变应原。
2.3油菜花粉变应原的纯化
2.3.1油菜花粉变应原的离子交换层析 用对DE-52离子交换层析缓冲液充分透析的油菜花粉粗浸液上柱。如图3结果显示,主要有8个蛋白峰。
2.3.2SDS-PAGE和Westernblotting进行检测离 子交换后各峰收集的样品进行SDS-PAGE,结果如图4。分析表明,离子交换层析后蛋白主要分布在I峰、II峰、Ⅲ峰和Ⅳ峰中,其中I峰II峰的蛋白条带相同,Ⅲ峰和Ⅳ峰的蛋白条带相同。免疫印迹结果显示(图5),主要变应原组分在Ⅰ峰、Ⅱ峰和Ⅲ峰。
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