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茶花粉黄酮对α -葡萄糖苷酶抑制作用的研究

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2016年10月10日 13时37分34秒 来源: 互联网
导读:为研究茶花粉黄酮对 α-葡萄糖苷酶的抑制作用,以茶花粉为原料,将提取、萃取及大孔吸附树脂处理得到的10 个组分分别进行黄酮含量及 α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定。

2.1.2 大孔吸附树脂分离组分的黄酮含量及其 α-葡萄糖苷酶抑制活性 

乙酸乙酯萃取相经 AB-8 型大孔吸附树脂吸附后,依次用浓度为 10% 、30% 、50% 、70% 、90% 的乙醇溶液进行洗脱,将各洗脱组分浓缩成浸膏,分别测定各浸膏的黄酮含量,结果表明( 表2) ,随着乙醇浓度的提高,各洗脱相中的黄酮含量先增加后降低,且各洗脱相中的黄酮含量差异显著,其中10% 和 90% 乙醇洗脱相中的黄酮含量最低,而 50% 乙醇洗脱相中的黄酮含量最高( 180.17 mg RE/g) ,这说明极性较高的低浓度乙醇( 10% ) 和极性相对较低的高浓度乙醇( 90% ) 对茶花粉黄酮的吸附效果均较弱,而极性介于这两者之间的 50% 乙醇对茶花粉黄酮的吸附效果较佳。
用无水乙醇将各洗脱组分的浸膏均复溶至浓度为 5 mg /mL 的溶液,测定各溶液的 α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明( 表 2) ,50% 乙醇洗脱相的 α-葡萄糖苷酶抑制活性最大,10% 和 90% 乙醇洗脱相的活性最小( p < 0.05) 。比较发现,这 5 个组分的黄酮含量大小与 α-葡萄糖苷酶抑制活性大小顺序一致。且表 1 显示,黄酮含量较高的乙酸乙酯相、正丁醇相的 α-葡萄糖苷酶抑制活性也较高,这说明茶花粉黄酮与其 α-葡萄糖苷酶抑制活性关系密切。为进一步明确茶花粉黄酮与 α-葡萄糖苷酶抑制活性之间的相关关系,将前文研究的茶花粉组分的黄酮含量与 α-葡萄糖苷酶抑制活性做相关性研究。

2.2 茶花粉黄酮含量与 α-葡萄糖苷酶抑制活性的相关系数

将前文研究的 10 种茶花粉组分( 茶花粉乙醇提取物、石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相、残余水相及大孔树脂 10% ,30% ,50% ,70% ,90% 乙醇洗脱相)的黄酮含量与 α-葡萄糖苷酶抑制活性做相关性研究,结果显示( 表 3) ,各样品的 α-葡萄糖苷酶抑制活性与黄酮含量呈极显著正相关,相关系数为 0.867( p < 0.01) ,有研究表明[14],芦丁对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性随着芦丁浓度的增加而增加,孙岩等[13] 研究发现,当油菜蜂花粉提取物中总黄酮含量达到一定程度后,油菜蜂花粉黄酮含量与油菜蜂花粉的α-葡萄糖苷酶抑制作用呈明显正相关关系。本研究结果显示,茶花粉各样品的黄酮含量与 α-葡萄糖苷酶抑制活性呈极显著正相关关系,因此可推测茶花粉中对 α-葡萄糖苷酶活性起抑制作用的主要活性因子为黄酮类物质。

2.3 茶花粉黄酮提取物对 α -葡萄糖苷酶的抑制效果

为研究茶花粉黄酮提取物对 α- 葡萄糖苷酶的抑制效果,本文以黄酮含量最高的大孔树脂 50% 乙醇洗脱相为进一步研究对象( 将其命名为茶花粉黄酮提取物) ,测定不同浓度的茶花粉黄酮提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,结果( 图 1) 表明: 在实验质量浓度 0.25~2.5 mg /mL,茶花粉黄酮提取物对 α-葡萄糖苷酶均具有一定的抑制作用,且其抑制效果与质量浓度之间具有量效关系。经非线性拟合,得茶花粉黄酮提取物对 α-葡萄糖苷酶抑制率的回归方程 为: y = - 0.3775x2 + 27.122x + 13.218 ( R2 =0.9933,式中: y 为 α-葡萄糖苷酶抑制率,x 为茶花粉提取物浓度) ,根据此方程计算得到茶花粉黄酮提取物对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度为 1.27 mg /mL,略低于阿卡波糖( IC50 = 0.97 mg /mL) 。
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